| 1.胃蛋白酶或蛋白酶K溶液(即用型) 2.雜交液(即用型) 3.雜交沖洗液(即用型) 4.封閉液(即用型) 5.鼠抗地高辛(即用型) 6.辣根過氧化物酶標記的羊抗鼠IgG聚合物(即用型) 7.DAB 3 組分(20×) | 6ml 6ml 6ml 6ml 6ml 6ml 每種組分1ml |
| ?1.脫蠟和脫水 ?? 二甲苯 ?? 二甲苯 ?? 100%酒精 ?? 100%酒精 ?? 空氣干燥或37℃烘干 | 5分鐘 5分鐘 3分鐘 3分鐘 5分鐘 |
| ?2.胃蛋白酶溶液(即用型)1-2滴覆蓋切片(不同的組織和探針可能需要不同的孵育時間) | 37℃孵育10分鐘或室溫孵育20分鐘 |
| ?3.用蒸餾水或0.1M TBS充分沖洗 | ? |
| ?4.脫水 ?? 80%酒精 ?? 95%酒精 ?? 100%酒精 ?? 空氣干燥或37℃烘干 | 1分鐘 1分鐘 1分鐘 5分鐘 |
| ?5.地高辛標記的DNA探針混和液(即用型)1-2滴覆蓋玻片 | 95℃孵育10分鐘 |
| ?6.37℃濕盒中雜交，4小時至過夜； | ? |
| ?7.TBS或PBS沖洗至洗脫蓋玻片; | ? |
| ?8.雜交沖洗液(即用型)1-2滴覆蓋玻片，37℃孵育10分鐘； | ? |
| ?9.清潔劑沖洗 | 2分鐘×2 |
| ?10.3%過氧化氫的甲醇溶液 | 10分鐘 |
| ?11.清潔劑沖洗 | 2分鐘×3 |
| ?12.封閉液(即用型) | ?10分鐘 |
| ?13.清潔劑沖洗 | ?2分鐘×3 |
| ?14.鼠抗地高辛(即用型) | ?30分鐘 |
| ?15.清潔劑沖洗 | ? 2分鐘×3 |
| ?16.辣根過氧化物酶標記的羊抗鼠IgG聚合物(即用型) | ?30分鐘 |
| ?17. DAB | ? 10-20分鐘 |
| ?18.蘇木素復染? | ?1-5分鐘 |
| ?19.蒸餾水充分沖洗 | ? |
| ?20. 脫水并除去二甲苯，封片。 | ? |
