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      石蠟組織切片抗原雙修復(胰酶+檸檬酸)方法

      發布時間:2013-3-18 11:38:28

      1、儀器設備:不銹鋼壓力鍋(邁新產品編號:HPC-1001),耐高溫塑料染色架(邁新產品編號:RAK-2001),電磁爐(120-2000W,可調節加熱功率和時間),電熱恒溫干燥箱,孵育盒。?
      2、所需試劑:檸檬酸抗原修復液(邁新產品編號:MVS-0100/0101或MVS-0066),胰酶抗原修復液(邁新產品編號:DIG-3008),蒸餾水,PBS緩沖液。?
      3、操作步驟:   
      ⑴ 石蠟切片脫蠟、水化,自來水沖洗(建議除去自來水,在離組織3mm處用免疫組   化油筆(邁新產品編號:PEN-0002)畫圈),PBS沖洗3×3分鐘;?
      ⑵ 除去切片上的PBS,切片上滴加適量已配制成工作液的胰酶溶液,并將切片放入孵育盒孵育15分鐘。PBS沖洗2×3分鐘。自來水沖洗并浸泡于水中待用;
      ⑶ 取適量已稀釋成工作液的檸檬酸抗原修復液(800-1500mL)于壓力鍋中,將壓力鍋放置于電磁爐上,大功率加熱至沸騰;?
      ⑷ 將功率調至中度(800-1000W),將切片置于耐高溫染色架上,放入已沸騰的修復液中,蓋上鍋蓋,扣上壓力閥,繼續加熱;?
      ⑸ 當壓力閥開始噴氣時計時1.5-2分鐘,然后將壓力鍋離開電磁爐,室溫自然冷卻10分鐘后,可用自來水在壓力鍋外壁沖淋加速鍋內修復液冷卻,冷卻至室溫后取出切片,自來水沖洗干凈,PBS沖洗2×3分鐘,之后按照邁新相關試劑盒的操作步驟執行。?
      4、注意事項:詳見石蠟組織切片抗原熱修復方法和抗原酶消化修復方法注意事項。