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      免疫細胞化學染色方法

      發布時間:2017-4-25 14:25:27

      1、細胞標本置于載玻片上;
      2、固定:建議使用95%乙醇或10%中性緩沖福爾馬林固定液固定10分鐘;
      3、稍水洗,載玻片上加1%Triton X-100試劑,室溫下孵育10分鐘,PBS沖洗3x3分鐘;
      4、根據第一抗體的要求,對細胞進行相應的抗原修復;
      5、如有必要,每張載玻片上加過氧化物酶阻斷試劑,室溫下孵育10分鐘,PBS沖洗3x3分鐘;
      6、除去PBS,載玻片上加第一抗體,室溫下孵育60分鐘或4℃過夜,PBS沖洗3x3分鐘;
      7、除去PBS,載玻片上加檢測試劑盒(按照試劑盒說明書進行操作),PBS沖洗3x3分鐘;
      8、除去PBS,根據檢測試劑盒選擇相應的顯色系統,最后中性樹膠封固。

      備注:更好的方法是通過離心或直接收集將細胞聚攏,再用蛋清或瓊脂包裹后形成細胞塊進行固定、脫水、包埋、切片,再按照免疫組化染色步驟進行操作。