1、細胞標本置于載玻片上；
2、固定：建議使用95%乙醇或10%中性緩沖福爾馬林固定液固定10分鐘；
3、稍水洗，載玻片上加1%Triton X-100試劑，室溫下孵育10分鐘，PBS沖洗3x3分鐘；
4、根據第一抗體的要求，對細胞進行相應的抗原修復；
5、如有必要，每張載玻片上加過氧化物酶阻斷試劑，室溫下孵育10分鐘，PBS沖洗3x3分鐘；
6、除去PBS，載玻片上加第一抗體，室溫下孵育60分鐘或4℃過夜，PBS沖洗3x3分鐘；
7、除去PBS，載玻片上加檢測試劑盒（按照試劑盒說明書進行操作），PBS沖洗3x3分鐘；
8、除去PBS，根據檢測試劑盒選擇相應的顯色系統，最后中性樹膠封固。
備注：更好的方法是通過離心或直接收集將細胞聚攏，再用蛋清或瓊脂包裹后形成細胞塊進行固定、脫水、包埋、切片，再按照免疫組化染色步驟進行操作。
